華譜生物科技(重慶)有限公司
電話:19922875888
網(wǎng)址:www.gongyeputaotang.cn
郵箱:huapushengwu@126.com
地址:重慶市江北區(qū)港橋支路4號7-2(附5號)
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產(chǎn)品名稱:T-2毒素免疫親和柱
產(chǎn)品品牌:HPSW
產(chǎn)品貨號:06996-2530
產(chǎn)品規(guī)格:3ml
【概要】
T-2毒素是單端孢霉素類中的主要毒素之一,是三線鐮刀菌、擬技孢鐮刀菌、梨孢鐮刀菌等產(chǎn)生的有毒代謝產(chǎn)物,屬鐮刀菌毒素類。本病發(fā)生的主要原因是動物采食了受T-2毒素污染的玉米、麥類等飼料。在生產(chǎn)中,T-2毒素中毒以豬最為多見,其次是家禽,反芻動物發(fā)生較少。
【適用范圍及性能】
用于定性、定量檢測谷物、酒類等食品和飼料等樣本中的玉米赤霉烯酮時的樣品前處理。
柱容量:≥1500ng
回收率:≥90%
【試驗原理】
本產(chǎn)品的測定的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng),T-2 toxin單克隆抗體連接在柱內(nèi)凝膠上,樣品中的T-2 toxin經(jīng)過提取、過濾、稀釋,然后將樣品提取液緩慢的通過T-2 toxin免疫親和層析柱,在免疫親和柱內(nèi),T-2 toxin與抗體結(jié)合,之后洗滌免疫親和柱除去沒有被結(jié)合的其他物質(zhì)。用甲醇洗脫玉米赤T-2 toxin,然后注入到分析儀器中用于檢測。
【包裝組成】
25支/盒,3mL柱管/支
產(chǎn)品說明書1份
【需要而未提供的設(shè)備及試劑】
設(shè)備:
┅┅高速均質(zhì)器或組織勻漿機(jī)
┅┅粉碎機(jī)
┅┅200ml/50ml量筒
┅┅天平:感量0.1g
┅┅微量移液器:單道 100ml~1000ml
┅┅槽紋濾紙(折疊快速定性或定量濾紙)
┅┅玻璃微纖維濾紙(1.5mm孔徑)
┅┅50ml漏斗
┅┅一次性玻璃試管
┅┅泵流操作架(包括空氣泵,不同容積的玻璃注射器等)
試劑:
┅┅甲醇(CH3OH):色譜純。
┅┅乙腈(CH3CN):色譜純。
┅┅ 甲苯(C6H5CH3):色譜純。
┅┅-二甲基氨基吡啶。
┅┅-蒽腈(1-anthroylnitrile,1-AN)。
┅┅蒸餾水或去離子水
┅┅pH7.0磷酸鹽緩沖溶液(PBS緩沖液):稱取8.0g氯化鈉,1.2g磷酸氫二鈉,0.2g磷酸二氫鉀,0.2g氯化鉀,用990mL純水溶解,然后用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值至7.0,最后用純水稀釋至1000mL
【試劑配制】
樣品提取液:配制甲醇-水(8:2)溶液作為樣品提取液
4-二甲基氨基吡啶溶液:準(zhǔn)確稱取0.0325g,4-二甲基氨基吡啶于100mL容量瓶中,用甲苯定容
至刻度
-蒽腈溶液:準(zhǔn)確稱取0.030g1-蒽腈于100mL容量瓶中,
甲苯定容至刻度
【樣本處理步驟】
提取
糧食及糧食制品
將樣品研磨,硬質(zhì)的糧食等用高速粉碎機(jī)磨細(xì)并通過試驗篩。稱取25.0g(精確到0.1g)過篩樣品于容量瓶中,用提取液定容至100mL,轉(zhuǎn)移至均質(zhì)杯中,以均質(zhì)器高速攪拌提取2min,定量濾紙過濾。
移取10.0mL濾液加入40mL水稀釋混勻,經(jīng)玻璃纖維濾紙過濾至濾液澄清,濾液備用。
醬油、醋、醬及醬制品
稱取25.0g(精確到0.1g)混勻的試樣,用甲醇定容至50.0mL,超聲提取10min,定量濾紙過濾。
移取10.0mL濾液加入40mL水稀釋混勻,經(jīng)玻璃纖維濾紙過濾至濾液澄清,濾液備用。
酒類
取脫氣酒類試樣(含二氧化碳的酒類使用前先置于4℃冰箱冷藏30min,過濾或超聲脫氣)或其他不含二氧化碳的酒類試樣20.0g(精確到0.1g)于50mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度,搖勻,定量濾紙過濾。移取10.0mL濾液加入40mL水稀釋,經(jīng)玻璃纖維濾紙過濾至濾液澄清,濾液備用。
凈化和洗脫
將免疫親和柱連接于玻璃注射器下,準(zhǔn)確移取10.0mL 上述的提取濾液,注入玻璃注射器中。 將空氣壓力泵與玻璃注射器連接,調(diào)節(jié)壓力使溶液以約1 滴/s的流速緩慢通過免疫親和柱,直至空氣進(jìn)入親和柱中。用10mL水淋洗親和柱,流速為1滴/s-2滴/s,直至空氣進(jìn)入親和柱中,棄去全部流出液,抽干小柱。準(zhǔn)確加入1.0mL甲醇洗脫,流速約為1滴/s,收集洗脫液。
衍生
標(biāo)準(zhǔn)工作液的衍生:取不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液各1mL,在50℃ 下用氮氣吹干,加入50μL,4-二甲基氨基吡啶溶液和50μL,1-蒽腈溶液,在渦旋混合器上混勻1min,50℃反應(yīng)15min,在冰水中冷卻10min后取出,50℃下氮氣吹干,用1.0mL流動相溶解,待HPLC測定。
樣品的衍生:將5.2中洗脫液在50℃下用氮氣吹干,按上述步驟進(jìn)行
【注意事項】
┅┅T-2 toxin危害很大,應(yīng)戴手套操作。
┅┅不要使用過了有效日期的免疫親和柱。
【貯藏條件及保存期】
貯藏條件:親和柱可于常溫保存,2-8℃儲存可延長有效期,不可凍存
保存期:該產(chǎn)品有效期為12個月。